匀浆 肝每50mg加（裂解液）0.5mlRIPA和5ULPMSF（不能预先加入，否则失效）
手动或电动匀浆。注意保持低温（埋在冰中），快速匀浆。
将样品转移到1.5ml离心管中，12000g离心，4℃，2-3min。
取少量上清进行考马斯亮兰595nm定量。
将所有蛋白样品调至等浓度（用裂解液），加loading buffer后，分成等体积的两部分（分别于-20℃、-70℃储存）。每次上样前加热98℃，5min。
(提取磷酸化的蛋白还需加Na3VO4 0.1mM及NaF 25mM)。
gel通常在0.5-1h内凝集最好，过快表示TEMED、APS用量过多，此时胶太硬易龟裂，而且电泳时容易烧胶。太慢则说明两种试剂用量不够或者系统实际不纯或实效。
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