陕西医学杂志２０１３年１０月第４２卷第１０期 １２９９ ＭＴＡ１和ＦＬＩＰ在食管鳞状细胞癌中的表达及意义 西安市中心医院心胸外科（西安７１０００３） 刘晨旭 周 斌▲ 摘 要 目的：探讨ＭＴＡ１和ＦＬＩＰ蛋白的表达与食管鳞癌的浸润、转移和分化程度之间的关 系，以及两者间的相关性。方法：８１例食管癌患者为研究对象，距癌组织边缘＞５ｃｍ的正常食管组 织３１例作为对照组。采用免疫组化的方法研究ＭＴＡ１、ＦＬＩＰ与食管癌临床病理参数之间的关系。 结果：①ＭＴＡ１蛋白在食管癌组织中阳性表达５９例，阳性率７２．８４％；正常组织中阳性表达５例， 阳性率１６．１３％，差异显著。②ＦＬＩＰ蛋白在食管癌组织中阳性表达６２例，阳性率７６．５４ ；正常组 织中阳性表达６例，阳性率１９．３５ ，０４，差异显著。③ＭＴＡ１、ＦＬＩＰ蛋白在食管癌组织阳性表达与患 者年龄、性别、肿瘤的长度均无关；ＭＴＡ１表达与肿瘤的组织分化程度、Ｔ分期和淋巴结转移有明显 相关性。ＦＬＩＰ的表达与肿瘤的组织分化程度无关，与肿瘤的Ｔ分期、淋巴结转移有明显相关性。 ④ＭＴＡ１和ＦＬＩＰ阳性表达存在明显正相关。结论：①ＭＴＡ１的高表达促进食管癌的生长，增强其 浸润和淋巴结转移的能力；ＦＬＩＰ的高表达，可能通过阻断凋亡通路参与食管癌的发生。②ＭＡＴ１ 的表达与ＦＬＩＰ的表达呈显著正相关，两者联合表达是食管癌具有高度侵袭性的生物学标志。 主题词 食管肿瘤 免疫组织化学 侵袭 转移 ＠ＭＴＡ１ ＠ＦＬＩＰ 【文章编号】１０００—７３７７（２０１３）１０—１２９９—０３ 【中图分类号】Ｒ７３５．１【文献标识码】Ａ食管癌是消化道最常见肿瘤，在我国发病率较高， ２ 方 法 使用ＳＰ法进行抗ＭＴＡ１和抗ＦＬＩＰ 免疫组织化学染色。阴性对照则使用ＰＢＳ代替一抗。 结果判定：阳性表达的细胞核内见棕黄色的颗粒。光 学显微镜下每张切片在诊断确切的食管癌组织中随机 选取５个高倍视野，每高倍视野计数１００个细胞。切 片内的阳性细胞数＞１０ 做为ＭＴＡ１或ＦＬＩＰ阳性 表达。 严重威胁着人民的健康Ｉ】］。近年来，许多与肿瘤浸润、 转移有密切关系的基因已相继被克隆出，其中肿瘤转 移基因（ＭＴＡ１）是进几年来发现的和信号传导及基因 调节有关的肿瘤转移相关基因。大量研究表明ｌ＿２ ］， ＭＴＡ１和许多种恶性肿瘤的浸润和转移有着密切的 关系。ＦＬＩＰ（ＦＬＩＣＥ—ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｐｒｏｔｅｉｎ）是近年来发 现的一类含有死亡效应结构域的凋亡、抑制蛋白，它广 ３ 统计学方法 所有数据经ＳＰＳＳ １１．０软件进 行处理，使用 检验，变量之间的关系分析则采用 ｓｐｅａｒｍａｎ等级相关分析，Ｐ＜０．０５差异有统计学意 义。 泛存在于病毒、真核生物和哺乳动物等许多物种中。 目前可证实ＦＬＩＰ与炎症、肿瘤及自身免疫性疾病的 发生、发展有密切的关系。本实验对人类食管癌组织 中ＭＴＡ１、ＦＬＩＰ的表达情况及两者问的关系进行分 析，以探讨ＭＴＡ１和ＦＬＩＰ蛋白的表达与食管鳞癌的 侵润、转移和分化程度之间的关系，以及它们两者之间 的相关性。 材料与方法 结 果 ＭＴＡ１蛋白、ＦＬＩＰ蛋白在食管癌组织中阳性率 均高于正常组织中阳性表达率（Ｐ＜０．０５）。ＭＴＡ１、 ＦＬＩＰ蛋白在食管癌组织阳性表达与患者年龄、性别、 肿瘤的长度均无关。ＭＴＡ１表达与肿瘤的组织分化 程度、Ｔ分期和淋巴结转移有明显相关性。ＦＬＩＰ的表 达与肿瘤的组织分化程度无关，与肿瘤的Ｔ分期、淋 巴结转移有明显相关性。ＭＴＡ１和ＦＬＩＰ阳性表达存 在明显正相关。见表１～５。 １ 材 料选取８１例食管癌患者的癌组织作为 研究对象，３１例距癌组织边缘＞５ｃｍ的正常食管组织 作为对照组。标本均为西安交通大学第二医院胸外科 手术切除的组织，人选的患者术前均未行放疗、化疗和 其他激素免疫治疗，术后病理诊断均为鳞癌。其中男 ６５例，女１６例，年龄４２～７２岁。病理类型、分期及淋 巴结的转移情况，经病理科医师确定。 表１ 两组ＭＴＡ１、ＰＬＩＰ表达比较 ▲通讯作者：西安交通大学医学院第二附属医院胸外科 １３００ 表２ ＭＴＡ１、ＦＬＩＰ在食管癌患者中表达与 肿瘤长度关系比较 表３ ＭＴＡ１、ＦＬＩＰ在食管癌患者中表达与 年龄、性别的关系比较 表４ ＭＴＡ１、ＦＬＩＰ在食管癌患者中的表达 与临床病理因素的关系 分化程度 高、中分化４５ １８ ２７ １２ ３３ 低分化 ３６ ５ ３１ ８ ２８ Ｔ分期 Ｔｌ、Ｔ２ ３３ １６ １７ １４ １９ Ｔ ４８ ６ ４２ ５ ４３ 淋巴结转移 Ｎ ２８ １３ １５ １２ １６ Ｎｌ及以上５３ ９ ４４ ７ ４６ 表５ ＭＴＡ１、ＦＬＩＰ在食管癌中的表达相关性 讨论 １ ＭＴＡ１在食管癌组织中的表达及意义 本组 资料食管鳞癌组织中ＭＴＡ１的阳性表达率为７２． ８４％，正常的组织为６．４５ 。这两者比较有显著差异 性（Ｐ＜０．０５），提示ＭＴＡ１在食管癌的发生中起到重 要的作用，可以作为诊断食管癌的一种重要的生物学 指标。本研究发现，ＭＴＡ１蛋白的阳性表达和患者的 年龄、性别及肿瘤长度均无关系（Ｐ＞０．０５）；ＭＴＡ１蛋 白在中、高分化组中的阳性表达率为６Ｏ．ＯＯ ，低分化 组为８８．８９ ９／６，二者比较有显著差异性（Ｐ＜０．０５），这 说明ＭＴＡ１蛋白的阳性表达和肿瘤的组织学的分级 有关系，并随着其分级的降低阳性表达水平明显的升 陕西医学杂志２０１３年１０月第４２卷第１０期 高；ＭＴＡ１蛋白的阳性表达和肿瘤的Ｔ分期、淋巴结 转移有显著的相关性（Ｐ％０．０５），说明ＭＴＡ１蛋白在 肿瘤的浸润、转移中起着显著的作用。推测其机制可 能是因为在ＭＴＡ１阳性表达的癌细胞中，ＭＴＡ１蛋 白可以和组蛋白去乙酰化酶结合，募集组蛋白去乙酰 化酶到目的基因启动子的区域，通过除去组蛋白的乙 酰基重塑染色质结构，使目的基因变得更加得紧密而 不利于继续转录＿４］。进而ＭＴＡ１可通过这种功能直 接或间接的作用于某些可以抑制肿瘤浸润、转移基因， 下调其转录过程，使肿瘤抑制基因的数量下降，从而促 使肿瘤的发生、发展。综上所述，ＭＴＡ１基因在食管 鳞癌的、增殖、侵袭和转移及临床进展中可能起着重要 的调节作用。 ２ ＦＬＩＰ在食管癌组织中的表达及意义 本研究 结果表明，ＦＬＩＰ在食管癌组织中的阳性表达率为７６． ５４ ，在正常肺组织为１９．３５ ，两者比较差异有显著 性（Ｐｄ０．０５），说明ＦＩ ＩＰ在食管癌组织中表达明显上 调。ＦＩ ＩＰ的表达与患者年龄、性别及肿瘤长度无相关 性（Ｐ＞０．０５）。ＦＬＩＰ与肿瘤的分化程度尽管无明显 相关性（Ｐ＞０．０５）。ＦＩ ＩＰ的表达与食管癌的Ｔ分期、 淋巴结转移均有显著相关性（Ｐ＜０．０５），并随着肿瘤 临床分期的增加、淋巴结转移，其表达水平逐渐升高。 这可能与以下机制有关：①ＦＬＩＰ的抑制凋亡作用。 ＦＩ ＩＰ含量增加，食管癌细胞凋亡减少，食管癌细胞过 度生长并易产生侵犯，同时过度生长的瘤体上癌细胞 脱落，造成转移。②ＦＩ ＩＰ增多，癌细胞得以对抗Ｔ细 胞的杀伤作用＿５］。以上研究结果提示，ＦＩ ＩＰ蛋白的表 达与食管癌的恶性转化密切相关，其在肿瘤中的高表 达能够抑制正常的细胞凋亡过程，从而细胞异常增生 和恶性转化，使癌细胞获得永生性。ＦＬＩＰ在肿瘤细胞 中表达越强，癌细胞的生存能力和肿瘤的恶性程度也 随之增高，癌细胞更容易侵袭周围组织而发生转移，从 而增加治疗难度。表明ＦＩ ＩＰ蛋白的高表达是预示预 后不良的标志。ＦＬＩＰ可成为肿瘤基因诊断性标志物 和肿瘤治疗的新靶点 。］。 ３ ＭＴＡ１、ＦＩ ＩＰ在食管癌中阳性表达的相关性 恶性肿瘤的发生、发展、侵袭转移，是一种高度选择 的非随机过程，是多个基因共同参与的结果，与多种分 子水平密切相关。ＦＬＩＰ基因的增多能够使正常的细 胞凋亡过程受到抑制。ＭＴＡ１基因为肿瘤转移相关 基因，通过此种功能直接或间接作用于某些抑制肿瘤 浸润转移基因，下调其转录，使肿瘤抑制基因的数量减 少，从而促使肿瘤的发生、发展，而与细胞凋亡过程无 关。但是与细胞凋亡抑制基因ＦＬＩＰ存在明显的正相 关。这可能是由于ＭＴＡＩ下调肿瘤抑制基因的数量， 陕西医学杂志２０１３年１Ｏ月第４２卷第１Ｏ期 而其数量的减少也间接的影响细胞凋亡的过程，但其 具体作用机制有待于进一步研究。联合检测ＭＴＡ１、 ＦＬＩＰ、表达对于临床高危复发病例，给予积极治疗，对 提高预后具有重要意义，并可作为建立食管癌预后模 型的重要指标。 参考文献 ［１］贺宇彤，侯浚，陈志峰，等．河北省磁县近３Ｏ年食管癌 １３Ｏ１ ［３］李雪华，杨 茜．细胞调亡与肝癌［Ｊ］．医学理论与实践， ２００２，１５（６）：６２３—６２４． ［４］ Ｓａｌｖｅｓｅｎ ＧＳ，Ｄｕｃｋｅｔｔ ＣＳ．ＩＡＰ ｐｒｏｔｅｉｎｓ：ｂ）ｏｅｋｉｎｇ ｔｈｅ ｒｏａｄ ｔＯ ｄｅａｔｈ＇ｓ ｄｏｏｒ［，Ｊ］．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｍｏｌ Ｃｅｉｌ Ｂｉｏｌ，２００２，３（６）： ４Ｏ卜４１０． ｒ５］Ｄｉ Ｓｏｍｍａ ＭＭ，Ｓｏｍｍａ Ｆ，Ｍｏｎｔａｎｉ ＭＳ，ｅｔ ａ１．ＴＣＲ ｅｎ— ｇａｇｅｍｅｎｔ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｍｅｍｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｔｏ Ｆａｓ（ＣＤ９５）一ｍｅｄｉａｔｅｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９９９，１６２（７）：３８５１－３８５８． 发病死亡趋势分析［Ｊ］．中华流行病学杂志，２００６，２７（２）： １２７—１３１． Ｅ６］梁瑞，赵安虎，任 宏，等．ＭＥＫ１在食管鳞癌中的表 ［２］Ｔｏｈ Ｙ，Ｐｅｎｃｉｌ ＳＤ，Ｎｉｃｏｌｓｏｎ ＧＬ．Ａ ｎｏｖｅｌ ｃａｎｄｉｄａｔｅ ｍｅｔａｓ— 达及意义ｒＪ］．陕西医学杂志，２０１０，１９（１０）：１３０９—１３１０． ｔａｓｉｓ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｇｅｎｅ，ｍｔａｌ，ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ［７］杨志江，李桂红，蒲红伟，等．食管癌组织中ｈｃｌ一２、ｃ—ｍｙｅ、 ｈｉｇｈｌｙ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｍａｍｍａｒｙ ａｄｅｎｏｃａｒｉｎｏｍａ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ．Ｃｄ— ｉＮＯＳ表达及其意义Ｉ－Ｊ］．陕西医学杂志，２００８，１６（６）：６８６— ｎａ ｃｌｏｉｎｇ，ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎａｌｙｓｅｓ［Ｊ］．Ｊ Ｂｉｏｌ ６８８． （收稿：２０１３－０６—２０） Ｃｈｅｍ。１９９４，２６９（３７）：９５８—９６３． 胆肠Ｒｏｕｘ—ｅｎ—Ｙ吻合抗返流术式改进的实验研究 西安医学院附属医院普外科（西安７１００７７） 常伟平 田 明 吕浩礼 于照祥 张 雷 摘 要 目的：探讨在胆肠吻合术中应用舌形肠瓣的抗返流作用。方法：建立胆肠吻合术实验 动物模型，在空肠吻合口处设计一“舌形”肠瓣，对实验动物行空肠残端引流液接袋观察２４ｈ，并行 上消化道钡剂造影以记录吻合口以上钡剂返流高度，通过统计学分析，判定其抗返流效果。结果： 空肠残端引流液接袋观察２４ｈ，对照组阳性６例，阴性４例，阳性率６Ｏ ；实验组阳性ｌ例，阴性９ 例，阳性率１０ 。对照组出现食物残渣的阳性率高于实验组（Ｐ＜０．０５）。钡剂返流高度对照组为 ４８±５．０ｃｍ，实验组为２５．２±６．３ｃｍ，对照组造影剂的返流高度高于实验组（Ｐ＜０．０５）。结论：舌形 肠瓣在胆肠吻合术中有一定的抗返流作用。 主题词 胆道外科手术 引流术 ＠抗返流术 ＠舌形肠瓣 【中图分类号１ Ｒ６５７．４【文献标识码】Ａ【文章编号１ １０００—７３７７（２０１３）１０—１３０１—０２ 胆肠内引流术临床应用广泛，目前最常用的术式 肠管横径），Ｙ型长臂拟切口吻合处不做直线切开，与 是Ｒｏｕｘ－ｅｎ—Ｙ胆肠吻合术，但术后胆肠之间失去了正 输入段空肠残端吻合口做对应半圆形切开（半圆直径 常的括约肌功能，容易出现返流性胆管炎。为此，我们 为肠管横径），然后端侧吻合按半圆对应常规间断全层 建立了近似于胆肠吻合术的实验动物模型，在空肠吻 缝合，缝合完毕后即在Ｙ型夹角肠腔内形成半圆舌形 合口处设计了一简单的“舌形”肠瓣，以观察其抗返流 肠瓣。所有实验猪空肠残端留置Ｔ型管并经右侧出 作用，现报道如下。 腹壁固定并夹闭备用。所有实验猪在关腹前将胃前壁 材料与方法 固定于切口上段，以备４周后行上消化道钡剂造影用。 １材 料 选取同龄成年体重约５０ｋｇ本地白 ４周后打开Ｔ管后空肠残端引流液接袋观察２４ｈ并进 猪２Ｏ只，随机分为实验组和对照组各１Ｏ只。 行统计学处理。引流液计量后进行上消化道钡剂造 ２ 方 法 对照组行近似于传统单纯Ｒｏｕｘ－ｅｎ— 影：经胃前壁腹壁固定点穿刺将钡剂注入胃内，Ｘ线机 Ｙ胆肠吻合术：行Ｙ型空肠吻合，将Ｙ型长臂（６０ｃｍ） 透视下记录吻合口以上钡剂返流高度，并进行统计学 残端固定于肝门处，但不打断胆总管行胆肠吻合术，以 处理 简化操作及方便收集返流液。实验组加间置舌形空肠 ３ 统计学分析 应用ＳＰＳＳ１７．０统计学软件分 瓣成形抗返流术。舌形空肠瓣成形操作如下：Ｙ型短 析处理，采用四格表资料的Ｆｉｓｈｅｒ确切概率法及ｔ检 臂输人段空肠断端吻合前做半圆型修剪（半圆直径为 验，Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。 结 果 ＊西安医学院附属医院科研项目（ＸＹＦＹ一０９—２７） １ 空肠残端引流液 空肠残端引流液接袋观察 ２４ｈ，如出现食物残渣判定为阳性，如无残渣，判定为
