紫外-可见分光光度法标准操作程序

紫外分光光度法标准操作程序

1．目的：建立紫外分光光度法标准操作程序，使紫外分光光度法操作规范化、标准化。

2．范围：适用于紫外分光光度法的检查或含量测定。

3．职责：质量管理部QC负责本规程的实施；质量管理部负责人负责本规程实施情况的监督。 4．规程

4．1原理：通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内的光吸收度，对该物质进行鉴别检查或含量测定。

4．2仪器和设备：UV-1800型紫外可见分光光度计、干燥箱、电子天平（感量0.0001g）。

4．3 试液与试剂：基准重铬酸钾、0.005mol/L硫酸溶液。 4．4 仪器的校正和检定：

4．4．1由于温度的变化对机械部分的影响，仪器的波长经常会略有变动，因此除应定期对所用的仪器进行全面校正检定外，还应于测定前校正测定波长。常用汞灯中的较强谱线237.83nm，253.65nm，275.28nm，296.73nm,313.16nm，334.15nm，

4．4．2 365.02nm，404.66nm，435.83 nm，6.07 nm，与576.96nm或用仪器中的氘灯的486.02 nm与656.10nm谱线进行校正，钬玻璃在279.4nm，287.5nm 333.7nm，306.9nm，418.5nm，460.0nm，484.5nm，536.2nm与637.5nm波长处有尖锐吸收峰,也可作波长校正用，但因来源不同会有微小的差，别，使用时应注意。

4．4．3吸收度的准确度可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解至1000ml,在规定的波长处测定并计算其吸收系数，并与规定的吸收系数比较，如下表，相对偏差应在±1%以内。 波长/nm 吸收系数

235 (最大) 124.5 257 (最小) 144.0 313 (最小) 48.62 350 (最大) 106.6

杂散光的检查可按下表的试剂和浓度，配制成水溶液，置1cm石英吸收池中，在规定的波长处测定透光率。

4．5对溶剂的要求：测定供试品前，应先检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求，吸收盛溶剂，以空气为空白（即空白光路中不置任何物质）测定吸收度。溶剂和吸收度池的吸收度，在220～240 nm范围内不得超过0.40，在241～250 nm范围内不得超过0.20，在251～300 nm范围内不得超过0.10，在300 nm以上不得超过0.05。 4．6操作方法

4．6．1测定时，除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用1㎝的石英吸收池，在规定的吸收峰波长±2nm以内测试几个点的吸收度，以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确，除另有规定外，吸收峰波长应在该品种项下规定的波长±2nm以内；否则应考虑该试样的真伪、纯度以及仪器波长的准确度，并以吸收度最大的波作为测定波长。一般供试品溶液的吸收度读数，以在0.3～0.7之间的误差较小。仪器的狭缝波带宽度应小于供试品的吸收带半宽度，否则测得的吸收度会偏低；狭缝宽度的选择，应以减小狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准，由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试品的吸收度后应减去空白读数，再计算含量。

4．6．2用作鉴别和检查项目的方法，分别按各品种项下的方法进行。鉴别项下吸收度读数的范围可根据制剂的实际含量和供试液的稀释倍数估算。 4．6．3用于含量测定的方法一般有以下几种。

4．6．3．1对照品比较法 按各种项下的方法，分别配制供试品溶液和对照品溶液，对照品溶液中所含被测成分的量应为供试品溶液中被测成分标示量的100%±10%，所用溶剂也应完全一致，在规定的波长测定供试品溶液和对照品溶液的吸收度后，按下式计算供试品中被测溶液的浓度：

CX=（AX/AR）CR

式中 CX为供试品溶液的浓度；

AX 为供试品溶液的吸收度； AR为对照品溶液的吸收度； CR为对照品溶液的浓度

4．6．3．2吸收系数法 按各品种项下的方法配制供试品溶液，在规定的波长处测定其吸收度，再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。用本法测定时，应注意仪器的校正和检定。

4．6．3．3计算分光光度法 采用计算分光光度法应慎重。本法有多种，使用时均应按各品种项规定的方法进行。当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时，波长的微小变化可能对测定结果造成显著影响，故对照品和供试品测试条件应尽可能一致。若测定时不用对照品，则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定。

5．标准依据：《中国兽药典》2000年版。出师表

两汉：诸葛亮

先帝创业未半而中道崩殂，今天下三分，益州疲弊，此诚危急存亡之秋也。然侍卫之臣不懈于内，忠志之士忘身于外者，盖追先帝之殊遇，欲报之于陛下也。诚宜开张圣听，以光先帝遗德，恢弘志士之气，不宜妄自菲薄，引喻失义，以塞忠谏之路也。

宫中府中，俱为一体；陟罚臧否，不宜异同。若有作奸犯科及为忠善者，宜付有司论其刑赏，以昭陛下平明之理；不宜偏私，使内外异法也。

侍中、侍郎郭攸之、费祎、董允等，此皆良实，志虑忠纯，是以先帝简拔以遗陛下：愚以为宫中之事，事无大小，悉以咨之，然后施行，必能裨补阙漏，有所广益。

将军向宠，性行淑均，晓畅军事，试用于昔日，先帝称之曰“能”，是以众议举宠为督：愚以为营中之事，悉以咨之，必能使行阵和睦，优劣得所。

亲贤臣，远小人，此先汉所以兴隆也；亲小人，远贤臣，此后汉所以倾颓也。先帝在时，每与臣论此事，未尝不叹息痛恨于桓、灵也。侍中、尚书、长史、参军，此悉贞良死节之臣，愿陛下亲之、信之，则汉室之隆，可计日而待也

。

臣本布衣，躬耕于南阳，苟全性命于乱世，不求闻达于诸侯。先帝不以臣卑鄙，猥自枉屈，三顾臣于草庐之中，咨臣以当世之事，由是感激，遂许先帝以驱驰。后值倾覆，受任于败军之际，奉命于危难之间，尔来二十有一年矣。

先帝知臣谨慎，故临崩寄臣以大事也。受命以来，夙夜忧叹，恐托付不效，以伤先帝之明；故五月渡泸，深入不毛。今南方已定，兵甲已足，当奖率三军，北定中原，庶竭驽钝，

攘除奸凶，兴复汉室，还于旧都。此臣所以报先帝而忠陛下之职分也。至于斟酌损益，进尽忠言，则攸之、祎、允之任也。

愿陛下托臣以讨贼兴复之效，不效，则治臣之罪，以告先帝之灵。若无兴德之言，则责攸之、祎、允等之慢，以彰其咎；陛下亦宜自谋，以咨诹善道，察纳雅言，深追先帝遗诏。臣不胜受恩感激。

今当远离，临表涕零，不知所言。