台盼蓝染色实验原理之巴公井开创作
时间：二O二一年七月二十九日
台盼蓝（Trypan Blue) 是细胞活性染料,经常使用于检测细胞膜的完整性,还经常使用于检测细胞是否存活.活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色.分子式：C34H24N6O14S4Na4,分子量: 960.82,可溶于水（10mg/ml).
实验原理：正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色.通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡.因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地域分活细胞和死细胞.台盼蓝是组织和细胞培养中最经常使用的死细胞鉴定染色方法之一.注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象.台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比力精确的定量.台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,而且把持非常简单. 实验步伐：
时间：二O二一年七月二十九日
时间：二O二一年七月二十九日
1、配制4%台盼蓝母液：称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4℃保管.使用时用PBS稀释至0.4%. 2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释. 3、染色：细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀.（终浓度0.04%）
4、计数：在3分钟内,分别计数活细胞和死细胞.
5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状.
6、统计细胞活力：活细胞率（%）= 活细胞总数/（活细胞总数+死细胞总数）×100% 注意：
1.保管条件：室温保管.
2.有潜在致癌危险,实验时穿实验服并戴一次性手套和口罩把持.
时间：二O二一年七月二十九日
时间：二O二一年七月二十九日
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