APP17肽对脑缺血大鼠记忆能力及海马Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

中华老年　脑血管病杂志２００７年５月第９卷第５期ｃｈ．ｍ　ＪＧｅｒｉａｌｒＨｅｍ＇ｔ　ＢｌａｉｎＶｅ￣ｅｌＤｉｓ，ｈｈｙ２００７，Ｖｏｌ９，Ｎｏ．５　・３１１・　．认知功能障碍研究．　ＡＰＰ１７肽对脑缺血大鼠记忆能力及海马Ｂｃｌ一２和　Ｂａｘ蛋白表达的影响　张馨，张昱，孙蓉，何雨　（吉林大学第一医院神经内科，吉林长春１３００２１）　摘要：目的研究ＡＰＰ１７肽对脑缺血大鼠记忆能力及海马Ｂｃ１．２和Ｂａｘ蛋白表达的影响。方法采用双侧颈总动脉　结扎方法制备前脑缺血致血管性痴呆大鼠模型，将大鼠随机分为假手术纽、手术组和治疗组，每组２４只，并观察　１７肽的保护作用，采用Ｍｏｒｉｒｓ水迷宫检测记忆能力，免疫组织化学检测海马Ｂｃ１．２和Ｂａｘ蛋白表达。结果　手　术组与假手术组比较，记忆能力明显下降（Ｐ＜０．０１），Ｂｃ１．２和Ｂａｘ免疫阳性细胞数增多（Ｐ＜０．０１），治疗组较手术　组记忆功能改善明显（Ｐ＜０．０１）。Ｂｅ１．２免疫阳性细胞数明显增多（Ｐ＜０．０１），Ｂａｘ免疫阳性细胞数明显减少（Ｐ＜　０．０１）。结论ＡＰＰ１７肽可能通过调节Ｂｃ１．２和Ｂａｘ蛋白表达来抑制细胞凋亡，从而改善脑缺血大鼠的记忆能力。　关键词：脑缺血；记忆；基因，ｂｃ１．２；海马；痴呆，血管性　中图分类号：Ｒ７４３．３　文献标识码：Ａ　文章编号：１００９．０１２５｛２００７）０５．０３１１．０３　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ＡＰＰ１７－ｍｅｒ　ｐｅｐｔｉｄｅ　ｏｎ　ｃａｐａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｍｅｍｏｒｙ　ａｎｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｃｌ－２　ａｎｄ　Ｂａｘ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｉｎ　ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ　ｏｆ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｓｃｈｅｍｉａ　ｒａｔｓ　ＺＨＡＮＧ　Ｘｉｎ，ＺＨＡＮＧ　Ｙｕ，ＳＵＮ　Ｒｏｎｇ，ｅｔ　ａｌ　（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆＮｅｕｒｏｌｏｇｙ，Ｆｉｒｓｔ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｆｏＪｉｌｉｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓａｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ　１３￣２１，Ｃｈ／ｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ＡＰＰ１７一ｍｅｒ　ｐｅｐｔｉｄｅ　ｏｎ　ｍｅｍｏｒｙ　ａｎｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｃｌ一２　ａｎｄ　Ｂａｘ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｉｎ　ｈｉｐｐｏｅａｍｐｕｓ　ｏｆ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｓｃｈｅｍｉａ　ｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｖａｓｃｕｌａｒ　ｄｅｍｅｎｔｉａ（ｖａｎ）ｍｏｄｅｌ　Ｗａｓ　ｆｏｒｍｅｄ　ｂｙ　ａｄｏｐｔｉｎｇ　ｈｔｅ　ｐｅｒｍａｎｅｎｔ　ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ　ｏｆ　ｂｉｌａｔｅｒａｌ　ｃｏｍｎｌｏｎ　ｃａｒｏｔｉｄ　ａｒｔｅｒｉｅｓ　ｉｎ　Ｗｉｓｔａｒ　ｒａｔｓ　ｔｏ　ｐｒｏｄｕｃｅ　ｔｈｅ　ｆｏｒｅｂｒａｉｎ　ｉｓｃｈｅｍｉａ．Ｔｈｅ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ＡＰＰ１７一ｍｅｒ　ｐｅｐｔｉｄｅ　Ｗａｓ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ．Ｔｈｅ　ｃａｐａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｍｅｍｏｒｙ　Ｗａｓ　ｓｍｄｉｅｄ　ｗｉｔｈ　ｈｔｅ　Ｍｏｒｒｉｓ　ｗａｔｅｒ　ｍａｚｅ．Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｃｌ一２　ａｎｄ　Ｂａｘ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　Ｗａｓ　ｓｔｕｄｉｄｅ　ｗｉｈｔ　ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｔａｉｎ—　ｉｎｇ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｉｎ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｓｃｈｅｍｉａ　ｍｏｄｅｌ，ｍｅｍｏｒｙ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜０．０１）ａｎｄ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｃｌ一２　ａｎｄ　Ｂａｘ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ａｓ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｓｈａｍ—ｏｐｅｒａｔｄｅ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．Ｏ１）．ＡＰＰ１７一ｍｅｒ　ｐｅｐｔｉｄｅ　ｓｉｇｎｉｉｆ—　ｃａｎｄｙ　ｉｍｐｒｏｖｅｄ　ｍｅｍｏｒｙ（Ｐ＜０．０１），ｍａｒｋｅｄｌｙ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｆｏ　Ｂｃｌ一２　ｐｒｏｔｅｉｎ（Ｐ＜０．０１）ａｎｄ　ｒｅ—　ｄｕｃｅｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｂａｘ　ｐｒｏｔｅｉｎ（Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　ＡＰＰ１７一ｍｅｒ　ｐｅｐｔｉｄｅ　Ｃａｎ　ｉｎｈｉｂｉｔ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｃｌ一２　ａｎｄ　Ｂａｘ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｉｎ　ｒａｔ　ｂｒａｉｎ．ＡＰＰ１７一ｍｅｒ　ｐｅｐｔｉｄｅ　ｍａｙ　ｉｍｐｒｏｖｅ　ｍｅｍｏｒｙ　ｉｎ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｓｃｈｅｍｉａ　ｒａｔｓ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｂｒａｉｎ　ｉｓｃｈｅｍｉａ；ｍｅｍｏｒｙ；ｇｅｎｅｓ，ｂｃｌ一２；ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ；ｄｅｍｅｎｔｉａ，ＶａｓＣｕｌａｒ　血管性痴呆ｖａｓｃｕｌａｒ　ｄｅｍｅｎｔｉａ，ＶａＤ）指在各种脑　护作用，其作用机制为调节凋亡过程中各种凋亡因　血管疾病基础上出现的获得性认知功能损害综合　子的表达　引。本实验以双侧颈总动脉结扎慢性缺　征，是一种慢性进行性疾病。ＡＰＰ１７肽是Ａ鹏５的　血致ＶａＤ大鼠为模型，研究ＡＰＰ１７肽与认知功能的　３１９—３３５肽段，是具有神经保护作用的可溶性淀粉　关系及其在ＶａＤ中抗凋亡的作用机制。　样前体蛋白ａ（ｓＡＰＰａ）的活性肽段，有神经营养作　用，有研究证实ＡＰＰ１７肽对神经细胞具有抗凋亡保　１材料与方法　１．１动物模型制备选用吉林大学实验动物部提　收稿日期：２００６－１０－１３　供的健康Ｗｉｓｔｒａ大鼠１５０只，鼠龄４个月，雌雄不　作者简介：张馨，女，１９７８年６月生，吉林春市人，医师，硕士，从　限，体重２８０　３５０克。利用Ｍｏｍｓ水迷宫淘汰学习　事神经内科专业。　能力差的大鼠９只，将合格大鼠随机分为假手术组、　通讯作者：张昱．Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｘｉｎ３８４０＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ　维普资讯 http://www.cqvip.com

中华老年心脑血管病杂志２００７年５月第９卷第５期Ｏｌｉｎ　Ｊ　Ｇｅｒｉａｌｌ＂Ｈｅａｒｔ　ＢｒａｉｎＶｅｓｓｅｌＤｉｓ，Ｍ町２００７，Ｖｏｌ９，Ｎｏ．５　手术组和治疗组（在实验中死亡６９只，剩余为７２　只，每组２４只），３组均按手术后４、８、１２及１６周４　个时间点观察，每个时间点６只。手术组大鼠用　差异（Ｐ＜０．０１）。治疗组与假手术组比较，有显著　性差异（Ｐ＜０．０１），治疗组与手术组比较，有显著　性差异（Ｐ＜０．０１，表１），说明治疗组较手术组记忆　１０％水合氯醛（０．３　ｍｌ／１００　ｇ）腹腔注射麻醉，颈部正　中切口，分离双侧颈总动脉，分别结扎双侧颈总动脉　的远近端，并从中间剪断，以确保阻断颈总动脉血　流，缝合创口。假手术组大鼠麻醉后，只分离双侧颈　总动脉，但不结扎、不剪断动脉。治疗组方法同手术　组，造模成功后，给予　１７肽３．５　只，腹腔注　射，１次／２　ｄ。ＡＰＰ１７肽购自北京宣武医院神经多肽　室。　１．２记忆功能检测利用Ｍｏｍｓ水迷宫检测大鼠　记忆功能及ＡＰＰ１７肽对其的影响。每只大鼠训练４　天，每天上、下午各２次，将大鼠面向迷宫池壁分别　从４个人水点放人水中，记录其在３　ｍｉｎ内寻找到并　爬上平台的时间，即逃避潜伏期。各组大鼠学会后　分别在术后４、８、１２、１６周重新进行游泳实验，大鼠　每次在３　ｍｉｎ内爬上平台的时间为大鼠记忆成绩，　每天２次，连续４天，计算平均成绩进行组间比较。　１．３病理学及免疫组织化学检测　用１０％水合氯　醛（０．３　ｍｌ／１００　ｇ）腹腔注射麻醉大鼠，麻醉后立即开　胸暴露心脏，左心室迅速插管，同时剪开右心房，快　速灌注生理盐水，待肝脏变白后，改灌４％的多聚甲　醛（ｐＨ７．４）２５０　ｍｌ，速度先快后慢，至大鼠四肢僵硬　为满意，取脑，再将脑置于４％多聚甲醛中浸置４～　６　ｈ（４℃）后，取视交叉后４　ｒａｉｎ处至小脑前的脑组织　用ＰＢＳ漂洗，经乙醇常规脱水，二甲苯透明后，浸蜡　包埋，连续４肿厚切片，进行ＨＥ、免疫组织化学染　色。海马区的锥体细胞层，在４０×１０倍光镜下随机　选择５个视野，做免疫反应阳性细胞数计数，计数方　法采用标准网格，以“个／视野”为单位，结果取５个　视野的平均值。实验中使用兔抗鼠Ｂｃ１．２抗体、兔抗　鼠Ｂａｘ抗体、ＤＡＢ显色剂、ｓＰ试剂盒、多聚赖氨酸，　均购自福州迈新生物技术公司。　１．４统计学方法各组资料结果均以　±ｓ表示，　采用ｔ检验进行统计学处理，应用ＳＰＳＳ　１３．０统计软　件，Ｐ＜０．０５为差异有显著性意义。　２结果　２．１记忆功能测定结果　以大鼠逃避潜伏期代表　记忆能力，逃避潜伏期越短，记忆能力越强。经过训　练已经学会游迷宫的各组大鼠，双侧颈总动脉结扎　术后４周时，记忆功能即出现下降，逃避潜伏期开始　延长，直至１６周时记忆功能障碍持续存在。手术组　与假手术组在４～１６周各时间点的比较，有显著性　功能改善。　表１备组大鼠小Ｉ＿Ｊ时１日Ｊ点水述冒逃避潜　伏期测试（　±ｓ，ｓ）　组另０　４Ｎ（６只）８Ｎ（６只）　１２周（６只）　１６Ｎ（６只）　｛　ｌ　１６．７８±９．５４　ｌ７．ｓＢ±ｌ０．　ｌ４．９５±８．６４　ｌ７．４７±９．３７　４７．３５±ｌ８．８１　５８．７８±２４　６７．１４±２９　６０．　绣６１　２８．６０±ｌ４．ｏ４＊△２６肌ｌ９．３ｌ　３１．２１扭　３３．２９±２３　注：与假手术组比较，　Ｐ＜Ｏ．０１；与手术组比较，　Ｐ＜Ｏ．０１　２．２各组大鼠海马Ｂｄ．２和Ｂａｘ免疫组织化学检测　结果　Ｂｅ１．２免疫阳性细胞质内出现棕黄色颗粒。　假手术组有少数的Ｂｅ１．２免疫阳性细胞，阳性反应　弱。手术组４周时海马Ｂｅ１．２免疫阳性细胞数增高　并达高峰，呈强阳性表达，持续到８周，以后逐渐下　降，至１６周时仍明显高于假手术组。治疗组与手术　组比较，Ｂｅ１．２免疫阳性细胞数明显增多（表２）。Ｂａｘ　免疫阳性细胞质内出现棕黄色颗粒。假手术组Ｂａｘ　免疫阳性细胞数很少，阳性反应弱。手术组４周时　海马Ｂａｘ免疫阳性细胞数明显增高并达高峰，呈强　阳性表达，持续到８周，以后逐渐下降，至１６周时仍　明显高于假手术组。治疗组与手术组比较，Ｂａｘ免　疫阳性细胞数明显减少（表３）。　表２各组大鼠／ｆ、同时Ｉ日１Ｊ点ｊ每与Ｂｄ－２免疫阳性　细胞数比较（元±ｓ，个／视野）　组另０　４Ｎ（６只）８Ｎ（６只）　１２Ｎ（６只）　１６Ｎ（６只）　４．９８±１．５７　５．５３±１．２２　３．３２±ｏ．９６　３．呕±ｏ．９２　２５．１６±８＿９５　２３．３４±９．６６　１５．７７±６．∞　ｌ４．３２±７．９８　３８．８５±９．　＊△３５．６１±７．８４＊△３１．４７±９．５９＊△３２．１２±８．签｝△　注：与假手术组比较，　Ｐ＜Ｏ．Ｏ１；与手术组比较，ＺＸｐ＜Ｏ．０１　表３各组大鼠不同时间点海马Ｂａｘ免疫　阳性细胞数比较（　±ｓ，个／视野）　组另０　４Ｎ（６只）８Ｎ（６只）　１２Ｎ（６只）　１６Ｎ（６只）　５．　±２．１６　６．３９±２．２４　８．赛±１．　６．５２±２．１５　赘　±ｌｏ．８５　４０．３５±８．为　３５．２２±９．８５　姗±ｌｌ　治－疗组（ｅａＲ）　２＆７６±９．６２　２０．３１±８．４９～２３．８７±９．３５～２￣．５２±８．７６　△　沣．－ｑ假手术绢比较．＊Ｐ＜０　０１：－ｑ手术绢比较．　Ｐ＜０．０】　维普资讯 http://www.cqvip.com

中华老年　脑血管病杂志２００７年５月第９卷第５期Ｃｈｉｎ　ＪＧｅｆａｌｒＨ￣ｒｒｔ　ＢｒａｉｎＶｅｓｓｅｌＤｉｓ，Ｍａｙ２００７，Ｖｏｌ９，Ｎｏ．５　３讨论　聚体诱导细胞凋亡；由于细胞自身的保护机制，Ｂｅ１．　２蛋白表达反应性上调，可使部分Ｂａｘ同源二聚体　分离，与Ｂｃ１－２蛋白形成异源二聚体发挥抑制凋亡的　作用。但Ｂａｘ蛋白表达占优势，导致海马神经元凋　亡。由于后循环对前脑供血渐渐产生代偿，故８周　后Ｂｅ１．２和Ｂａｘ蛋白表达逐渐下降，但由于缺血仍然　存在，两者表达仍然较假手术组上调。治疗组由于　ＡＰＰ１７肽的神经营养作用，明显上调Ｂｅ１．２蛋白表　达，降低Ｂａｘ蛋白表达，从而减少海马神经元凋亡，　改善大鼠记忆能力。　ＶａＤ是痴呆的常见类型，其发病机制仍不十分　清楚，现在认为ＶａＤ的发生原因与血管本身的病理　变化有一定关系。细胞凋亡是指为维持内环境稳　定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。近来研　究发现，当凋亡机制发生异常时，可导致机体细胞非　正常的生理性死亡而致病。在神经系统，许多神经　退行性疾病可能与相应功能神经元过早、过度凋亡　有关。　研究表明海马是对脑缺血最敏感的区域之一，　海马损伤的动物记忆力明显下降，引起ＶａＤ的重要　原因之一就是脑缺血致海马损伤ｂｊ。Ｂｅ１．２家族是　细胞凋亡过程中重要的调节因子，此家族包括两类　根据本研究结果，我们推测ＡＰＰ１７肽可能通过　调节Ｂｅ１．２、Ｂａｘ蛋白表达来抑制细胞凋亡，从而改　善慢性脑缺血大鼠的记忆能力，对ＶａＤ的临床研究　具有重要意义。但ＡＰＰ１７肽调节Ｂｃ１．２、Ｂａｘ蛋白表　功能相反的蛋白，促凋蛋白如Ｂａｘ、Ｂａｄ等，抑凋蛋白　如Ｂｅ１．２、Ｂｅ１．ｘｌ等。Ｂｅ１．２与Ｂａｘ是缺血性脑损伤中　达机制尚不十分明确，有待于进一步研究。　参考文献：　［１］赵咏梅，赵志炜．ＡＰＰ１７肽对Ｄ一半乳糖脑老化模型小鼠神经元　凋亡的影响［Ｊ］．中华老年医学杂志，２ＯＯ２，２１：２０２—２０５．　［２］王蓬文，赵志炜．ＡＰＰ１７肽对　半乳糖脑老化小鼠海马凋亡相　关基因表达的影响［Ｊ］．解剖学报，２００３，３４：２６６—２６８．　［３］Ｍａｒｉｎａ　ＶＦ，Ｌａｒｉｓａ　Ｋ，Ｃｈｒｉｓｉｔａｎ　Ｇ．Ｓｐｅｃｉｉｆｃ　ｇａｐ　ｊｕｎｃｔｉｏｎ　ｅｎｈａｎｃｅｓ　ｔｈｅ　ｎｅｕｒｏｎａｌ　ｖｕｌｎｅｒａｂｉｌｉｔｙｔｏ　ｂｒａｉｎｔｒａｕｍａｔｉｃｉｎｊｕｒｙ［Ｊ］．Ｊ　Ｎｅｕｍ￣ｉ，２Ｏ０２，　２２：６４４．６５３．　重要的凋亡基因　］，大鼠局灶性脑缺血存在　Ｂｅ１．２和Ｂａｘ的表达，Ｂｅ１．２阳性神经细胞随再灌注时　间延长多数存活，而Ｂａｘ阳性细胞随再灌注时间延　长多趋死亡，Ｂｅ１．２和Ｂａｘ的比例决定细胞凋亡的趋　势　６　］。研究证明，在脑缺血后细胞凋亡的信号通路　中，细胞色素ｃ从线粒体外膜上形成的蛋白孑Ｌ道释　放人胞浆是诱导细胞凋亡的关键环节　８Ｊ，Ｂｅ１．２家族　通过直接控制线粒体外膜通透性的改变引起细胞凋　亡＿９Ｊ　。脑缺血后线粒体功能受损，线粒体内ｃａ２　浓度增加，促凋亡基因ｂａｘ表达增加，抑凋亡基因　［４］Ｚｈａｏ　Ｈ，Ｙｅｎａｒｉ　ＭＡ，Ｃｈｅｎｇ　Ｄ，ｅｔ　ａ１．Ｂｃｌ－２　ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｐｒｏｔｅｃｔｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ｎｅＬｌｒｏｎｌｏｓｓｗｉｔｈｉｎｔｈｅｉｓｃｈｅｍｉｃｍａｒｇｉｎｆｏｌｌｏｗｉｎｇ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｓｔｒｏｋｅ　ｎｄ　ｉａｎｈｉｂｉｔｓ　ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ　Ｃ　ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃａｓｐａｓｅ一３　ａｃｔｉｖｉｔｙ　［Ｊ　Ｊ．Ｊ　Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ，２００３，８５：１（Ｐ－６－１０３６．　［５］ＡｌｍｅｉｄａＯＦ，ＣｏｎｄｅＧＬ，Ｃｒｏｃｈｅｍｏｍ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．Ｓｕｂｔｌｅ　ｓｈｉｆｔｓｉｎ山ｅ　ｒａ－　ｔｉｏ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｐｒｏ－ａｎｄ　ａｎｔｉａｐｅｐｔｏｔｉｃ　ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　ａｆｔｅｒ　ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｒｔｉｃｏ　Ｂｅ１．２表达降低，Ｂａｘ由胞浆转向线粒体，细胞色素ｃ　从线粒体释放到胞浆，促使细胞凋亡＿１　。Ｂａｘ诱导　凋亡的机制是Ｂａｘ同源二聚体的形成，Ｂｅ１．２蛋白的　ｓｔｅｒｏｉｄ　ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ　ｄｅｄｄｅ　ｎｅｕｒｏｎａｌ　ｆａｔｅ［Ｊ］．ＦＡＳＥ　Ｂ　Ｊ，２Ｏ０Ｏ，１：７７９—　７９０．　抑制凋亡作用则要通过与Ｂａｘ结合形成异源二聚体　来实现口　。体外实验证实ＡＰＰ１７肽能明显改善Ｂ淀　粉样蛋白和谷氨酸诱导的神经细胞凋亡＿１“。有研　［６］Ｏｕｙａｎｇ　ＹＢ，Ｇｉｆｆｉａｒｄ　ＲＧ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ　ｎｅｕｍｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｉｎ　ｃｅ—　ｒｅｂｒａｌ　ｉｓｃｈｅｍｉａ：Ｂｃｌ－２　ｆ￣ｎｉｌｙ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ａｎｄ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｌＪ　Ｊ．Ｃｅｌｌ　Ｃａｌｃｉｕｍ，２００４，３６：３０３—３１１．　究显示ＡＰＰ１７肽是通过存活因子支持细胞存活的　共同中介物蛋白激酶Ｂ磷酸化前凋亡蛋白Ｂａｄ，使　［７］Ｏｒｒｅｎｉｕｓ　Ｓ．Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｐｅｐｔｏｔｉｃ　ｃｅｌｌ　ｄｅａｔｈ［Ｊ］．Ｔｏｘｉ—　ｃｏｌ　Ｌｅｔｔ，２ＯＯ４，１４９：１９—２３．　游离的Ｂｅ１．２增加、Ｂａｘ降低等途径，引起Ｂｃ１．２等下　游靶位基因的表达，达到抗凋亡作用的　ｊ。　本实验结果显示，在大鼠双侧颈总动脉永久结　扎后４周时，记忆功能即出现下降，直至１６周时记　忆功能障碍持续存在，治疗组较手术组记忆功能改　［８］ｓｈｉ　Ｙ．Ａ　ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ｖｉｅｗ　ｏｆ　ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ－ｍｅｄｉａｔｅｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｎａｔ　Ｓｔｅｅｔｒ　Ｂｉｏｌ，２００１，８：３９４－４０１．　［９］Ｃｏｌｏｍｂａｉｏｎｉ　Ｌ，Ｆｒａｇｏ　ＬＭ，Ｖａｒｅｌａ－Ｎｉｅｔｏ　Ｉ，ｅｔ　ａ１．Ｓｅｍｍ　ｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ　ｉｎｃｒｅａｓｅｓ　ｃｅｒａｍｉｄｅ　ｌｅｖｅｌｓ　ａｎｄ　ｉｎｄｕｃｅｓ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｉｎ　ｕｎｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ　ＨＮ９．１０ｅ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ　Ｉｎｔ，２Ｏ０２，４０：３２７—３３６．　［１０］Ｚｈｕ　Ｙ，Ｐｒｅｈｎ　ＪＨ，Ｃｕｌｍｓｅｅ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．１１１ｅ　ｂｅｔａ２一ａｄｍｎｏｅｅｐｔｏｒ　ａｇｏｎｉｓｔ　ｃｌｅｎｂｕｔｅｍｌ　ｍｏｄｕｌｔｅａｓ　Ｂｃｌ－２，Ｂｃｌ－ｘｌ　ａｎｄ　Ｂａｘ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｆｏｌｌｏｗ—　善。术后４周海马Ｂｅ１．２和Ｂａｘ免疫阳性细胞数明　显增高并达高峰，呈强阳性表达，持续到８周，以后　逐渐下降，至１６周时仍明显高于手术组，但Ｂｅ１．２升　高幅度小于Ｂａｘ。治疗组与手术组比较Ｂｅ１．２免疫　阳性细胞数明显增多，而Ｂａｘ免疫阳性细胞数明显　减少。慢性缺血时Ｂａｘ蛋白表达增加，形成同源二　ｉｎｇ　ｔｒａｎｓｉｅｎｔ　ｆｏｒｅｂｒａｉｎ　ｉｓｃｈｅｍｉａ　ｌＪ　Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１９９９，９０：１２５５—　１２６３．　［１１］　王蓉，张景艳．ＡＰＰ１７肽对邶导致神经元毒性作用的影响　［Ｊ］．首都医科大学学报，２００１，２２：２０２—２０５．　（本文编辑：银燕）