影响姜黄中姜黄素因素的研究
摘 要
以总姜黄素含量为考察指标,采用正交优化乙醇法提取姜黄中姜黄素,用分光光度法对姜黄素提取液总姜黄素含量进行检测。考察了料液比、浸提时间、温度、乙醇浓度等因素对提取量的影响。
关键词 姜黄素 姜黄 提取
1.前言
姜黄为姜科姜黄属植物姜黄的根茎。姜黄素是从姜科植物姜黄中提取的一种色素,
也存在其它姜科植物中。姜黄素不仅是一种优良的天然食用色素,而且还具有十分广泛的药用价值,现发现姜黄素具有利胆、降血脂、抗病毒、抗炎、抗氧化、抗肿瘤、防止衰老和延年益寿的作用。因此,研究姜黄中有效成分提取技术具有重要的现实意义。提取工艺的方法有很多,但存在着操作过程复杂、pH 值对有效成份的影响大、不易控制和不宜工业化大生产等缺点。
2.实验目的
研究以固液比、浸提时间、温度、乙醇浓度等因素对提取姜黄中总姜黄素的影响,
确定正交试验考查范围,筛选出了优化工艺条件。
3.实验原理
姜黄素为橙黄色结晶粉末,味稍苦。不溶于水,溶于乙醇、丙二醇,易溶于冰醋酸和
碱溶液,对光、热、铁离子敏感,耐光性、耐热性、耐铁离子性较差。通过改变固液比、浸提时间、温度、乙醇浓度等因素,探究姜黄中总姜黄素主要由什么影响。
4. 实验器材
紫外可见分光光度计、1ml移液管、热恒温水浴锅、分析天平、离心机,50ml的容量
瓶6个,250ml容量瓶一个,玻璃棒。
5、实验材料及试剂
5. 1 实验试剂及其配制
30%的乙醇溶液:准确量取95%的无水乙醇15.8ml,加水定容至50ml. 40%的乙醇溶液:准确量取95%的无水乙醇21.1ml,加水定容至50ml. 50%的乙醇溶液:准确量取95%的无水乙醇26.3ml,加水定容至50ml.
1
60%的乙醇溶液:准确量取95%的无水乙醇31.6ml,加水定容至50ml. 70%的乙醇溶液:准确量取95%的无水乙醇184.21ml,加水定容至250ml 75%的乙醇溶液:准确量取95%的无水乙醇39.5ml,加水定容至50ml 80%的乙醇溶液:准确量取95%的无水乙醇42.1ml,加水定容至50ml 5. 2实验材料及其处理
把新鲜的姜黄洗净,烘干,粉碎,过40目筛,备用。
6.实验操作步骤
6.1准备工作
清洗容量瓶,移液管及需要的玻璃器皿。配制试剂。按仪器说明书检查仪器,开机预热20min。
6.2 绘制姜黄素的吸收曲线并选择测量波长
称取0. 100 g 姜黄粉末,加5 mL 无水乙醇浸提2 h,离心分离,取离心液 加50%乙醇溶液。用50% 乙醇做参比,调节波长测定在不同的波长下姜黄素的吸光值,在380~450nm间,每隔10nm测量一次吸光度。在峰值附近每隔5nm测量一次。以波长为横坐标,吸光度为纵坐标确定最大吸收波长max。 6.3姜黄素标准曲线的绘制
以原溶液的姜黄素含量浓度为相对标准,其相对含量为1。稀释, 稀释倍数分别为为
0.25、0.125、0.025、0.0125 、0.0025,以逐级稀释后的吸光度A 对相对浓度作图,取其成线性的范围做以后测量的A 取值范围。 6.4温度的影响
分别取姜黄粉末质量为0. 158 g、10 mL70% 乙醇溶液8组,用不同温度浸泡30 min,
温度梯度分别为25、30、35、40、45、50、55、60°C,提取液稀释64倍,测出其吸光度。 6.5浸提时间的影响
分别取姜黄粉末质量为0. 158 g、10 mL70% 乙醇溶液、温度40℃,不同浸提时间下
提取液稀释64倍,浸提时间分别为30、40、50、60、70、80、90、100、110、120min,稀释64倍,测吸光度。 6.6乙醇浓度的影响
姜黄粉末质量为0. 158 g、温度40℃、浸提时间30 min,10 mL 不同乙醇浓度下提取
液稀释64倍,乙醇浓度分别为30%、40%、50%、60%、70%、80%,稀释64倍,测吸光度。 6.7固液比的影响
在70%乙醇溶液10 mL、温度30℃、浸提时间30 min,不同质量姜黄粉末下的提取液稀释64 倍,姜黄的质量分别为0. 057、 0. 1003 、0. 1501 、0. 2008 、0. 2503 、
2
0. 3001、 0. 3501、 0. 4004、 0. 4503g,测吸光度。
7.结果及计算
表1 标准曲线测量数据及记录结果
相对浓度(mol/L) 吸光度A
表2 不同温度测量数据及记录结果
温度25 (°C) 吸光度 A 30 35 40 45 50 55 60 0.25 0.125 0.025 0.0125 0.0025
浸提 时间30 (min) 吸光 度A 40 表3 不同浸提时间测量数据及记录结果 50 60 70 80 90 100 110 120
表4 不同乙醇浓度测量数据及记录结果 乙醇浓度30 (%) 吸光度A 姜黄0.057 0.100质量m 3 吸光 度A A/m 因素 水平1 水平2 水平3
40 50 60 70 80 表5 固液比测量数据及记录结果 0.1500.2000.2500.3000.3501 8 3 1 1 0.4004 0.4503 表6 正交试验因素水平表 A姜黄质量(m/g) B乙醇浓度(%) 3
C浸泡时间(min)
实验号 A B C 吸光度A 1 2 3 表7 正交试验表 4 5 6 7 8 9 8.注意事项
8.1紫外分光光度计的使用:在显色过程中,没加入一种试剂或样品,均要摇匀。在考察同一因素对显色反应的影响时,应保持仪器的测定条件。在测量过程中,应不时重调仪器零点和参比溶液T%=100。试验应完全透明,如有浑浊,应预先过滤。
8.2姜黄的使用 ;由于姜黄素热稳定性较差,温度过高,会导致损失,所以。试验过程中要十分注意。
8.3 实验报告:实验报告要进行数据记录,并进行处理,根据表7可得到最优解,最后要得出结论。
9.费用预算
材料费: 名称 单价 数量 合计 交通费:10元 总计:24元
姜黄 95%无水乙醇 6元 8元 一斤 一瓶 14 元 参考文献:
[1]国家药典委员会. 中华人民共和国药典( 一部) [M].北京: 化学出版社, 2005, 186.
[2]李侠,陈炳卿,宋其林. 姜黄素对大鼠肝系统及谷胱甘肽-S-转移酶活性的影响[J]. 卫生毒理学杂志,1997,11( 4) : 293-295. [3]刘立民,常喜,王伟华,等. 姜黄素对前列腺癌PC-3M
细胞抗侵袭作用的研究[J]. 中国实验诊断学, 2006, 109) : 1085-1087. [4]姚运红,余健华,熊晖,等. 姜黄素抑制鼻咽癌细胞增殖及血管内皮生长因子基因表达的研究[J]. 四川大学学报( 医学版) , 2006, 37( 4) : 647-649. [5]黄灵芝,李丽峰,董君英. 大孔树脂提取纯化姜黄素的研究[J]. 精细化工中间
4
体, 2007, 37( 5) : 24-26
5
因篇幅问题不能全部显示,请点此查看更多更全内容